تشخیص سریع و اختصاصی سالمونلا تیفی موریوم با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز-الایزا (pcr-elisa)

نویسندگان

hassan ardestani

department of biology, imam hossein university, tehran, iran seyed latif mousavi gargari

department of biology, faculty of basic sciences, shahed university, tehran, iran shahram nazarian

department of biology, baqiyatallah university, tehran, iran jafar amani

department of biology, baqiyatallah university, tehran, iran

چکیده

هدف: سالمونلا تیفی موریوم یکی از بیماری زاهای مهم غذایی است که باعث ایجاد گاستروانتریت می شود. در این تحقیق روش pcr-elisa برای شناسایی سالمونلا تیفی موریوم به کار گرفته شده است. مواد و روش ها: ژن rfb، که مسئول بیوسنتز آنتی ژن o از لیپوپلی ساکارید باکتری است، به عنوان توالی هدف انتخاب گردید. آغازگرهای تعیین شده منجر به تکثیر قطعه 882 جفت بازی برای گونه سالمونلا تیفی موریوم شد. نمونه های غذایی آلوده به باکتری سالمونلا تیفی موریوم و همچنین نمونه های بالینی و گونه های استاندارد مورد بررسی و آزمایش قرار گرفت. محصول pcr به طور تصادفی با دیگوکسی ژنین نشان دار و به کف ظرف های دارای استرپتواویدین منتقل و به روش الایزا و با استفاده از آنتی بادی ضد دیگوکسی ژنین مورد بررسی قرار گرفت. از کاوشگر داخلی نشان دار با بیوتین نیز برای تأیید محصول pcr استفاده گردید. نتایج: اختصاصی بودن روش با بررسی 20 نمونه سالمونلا و 6 نمونه غیر سالمونلا ارزیابی شد که فقط نتایج گونه تیفی موریوم مثبت و بقیه گونه ها منفی بود. الایزا دقت و حساسیت روش pcr را تا حدود 1000 برابر افزایش داد. نتیجه گیری: روش ارائه شده در این تحقیق با توجه به طولانی بودن روش های مرسوم کشت، برای تأیید وجود باکتری در نمونه های بالینی و غذایی می تواند یک شیوه تشخیصی حساس و کارآمدی برای شناسایی و غربالگری سالمونلا تیفی موریوم باشد. روش حاضر در غربالگری های وسیع با توجه به حساسیت بالا می تواند ضمن تشخیص اختصاصی تر، جایگزین خوبی برای pcr باشد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

تشخیص آلودگی جوجه های گوشتی به مایکوپلاسما گالی سپتیکوم با روش الایزا (ELISA) و واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) ارجاعی به آزمایشگاه تشخیص دامپزشکی شهرستان گرگان

 مقدمه و هدف: مایکوپلاسما گالی سپتیکوم و مایکوپلاسما سینویه بعنوان مهمترین پاتوژن های مایکوپلاسمایی در طیور محسوب می شوند که ضررهای اقتصادی شدیدی را بر صنعت طیور در سرتاسر دنیا وارد می سازند. آلودگی به مایکوپلاسما گالی سپتیکوم در جوجه ها باعث بیماری مزمن تنفسی و در نتیجه کاهش تولید گوشت و تخم می شود. به دلیل اینکه برنامه های کنترلی موفق بستگی به تشخیص صحیح و به موقع گله های آلوده دارند. بن...

متن کامل

طراحی واکنش زنجیرهای پلیمراز برای تشخیص مولکولی سالمونلا تیفی

سابقه و هدف: سالمونلا انتریکا سروتایپ تیفی، باکتری مولد بیماری تب تیفوئید میباشد که سالانه بیش از 16 میلیون نفر در جهان به آن مبتلا میشوند و حدود 600 هزار نفر نیز در اثر آن می میرند. روشهای کلاسیک تشخیص این بیماری اغلب وقتگیر میباشند و از حساسیت کافی برخوردار نیستند. هدف این مطالعه، ارائهی نوعی روش مولکولی واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR: Polymerase Chain Reaction) برای تشخیص سریع و انجام اقدامهای ...

متن کامل

شناسایی کلستریدیوم سپتیکوم به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)

li . a3"9rl aiL,;.61'l,.lo95g9s,r";lo.r;'l,q,Jtaer{J*-;*J5O+.t1r (PCR) al:9, .,rat5':.1"ri+.ltL" : g rb .a991la.iL;.5$.ir 95 2g;,r, A 9; *a llo'r,il.spyl.;-*l5ar-9ulA :ba!9al u9fe,rrl.lhrl ol..id4jlpbd I . 6.r^ir95o;U g9s'tn 31 6 tl ty. * y; : t;' 9 t l, PCR pt+l .bte-;IDNA 6l.g*l ,LJ:.1;"-J5d;t h+i5lt.#t^i .A.J'-6Jij j4'f.i 1l o'& u>lp uet a3l.5b.rol;;l osl'i;rl {f fupt{tl*J5 t;*Sl 9a:-...

متن کامل

تشخیص سریع مولکولی سالمونلا تیفی به روش PCR با استفاده از ژن invA در نمونه های مواد غذائی

مقدمه: به دلیل این که سالمونلا تیفی یک پاتوژن روده ای مهم و آلوده کننده آب و غذا می باشد، تشخیص سریع و دقیق آن در آب و مواد غذائی بسیار حائز اهمیت است. امروزه تشخیص سریع باکتری های بیماری زا با تکنیک های نوین در مواد غذایی از اهمیت زیادی برخوردار است. هدف از انجام این مطالعه جداسازی سالمونلا تیفی در مواد غذایی آلوده با روش PCR با استفاده از ژن invA بوده است. مواد و روش ها: بعد از استخراج DNA ب...

متن کامل

تشخیص آلودگی جوجه های گوشتی به مایکوپلاسما گالی سپتیکوم با روش الایزا (elisa) و واکنش زنجیره ای پلیمراز (pcr) ارجاعی به آزمایشگاه تشخیص دامپزشکی شهرستان گرگان

مقدمه و هدف: مایکوپلاسما گالی سپتیکوم و مایکوپلاسما سینویه بعنوان مهمترین پاتوژن های مایکوپلاسمایی در طیور محسوب می شوند که ضررهای اقتصادی شدیدی را بر صنعت طیور در سرتاسر دنیا وارد می سازند. آلودگی به مایکوپلاسما گالی سپتیکوم در جوجه ها باعث بیماری مزمن تنفسی و در نتیجه کاهش تولید گوشت و تخم می شود. به دلیل اینکه برنامه های کنترلی موفق بستگی به تشخیص صحیح و به موقع گله های آلوده دارند. بنابراین...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
پژوهش های آسیب شناسی زیستی

جلد ۱۰، شماره Spring ۲۰۰۸، صفحات ۵۱-۶۲

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023